Д.Ю.Рязанцев, Э.М.Чудинова, Л.Ю.Кокаева, С.Н.Эланский, П.Н.Балабко, Г.Л.Белова, С.К.Завриев
Занбӯруғи фитопатогении Colletotrichum коккодҳо дар картошка ва помидор бемориҳои хатарнокро ба вуҷуд меорад, ки бо номи антракноз ва доғи сиёҳи лӯнда маълуманд. Аз рӯи хусусиятҳои морфологӣ, онҳоро аксар вақт фарқ кардан аз бемориҳои бо сабаби микроорганизмҳои дигар душвор аст; дар меваҳои сабз помидор, беморӣ метавонад асимптоматӣ бошад ва танҳо дар меваҳои сурх пухтааст зоҳир шавад. Барои ташхиси зуд ва дақиқи патоген, системаи озмоиши PCR дар вақти воқеӣ пешниҳод карда мешавад. Барои таҳияи системаи озмоиш пайдарпайии нуклеотидҳои гени глицеролтрифосфат дегидрогеназаи 45 C. штаммҳои аз лӯндаи картошка ҷудошудаи коккодҳо дар минтақаҳои гуногуни Русия муайян карда шуд.
Дар асоси натиҷаҳои бадастомада ва таҳлили пайдарпаии шабеҳи намудҳои дигар, ки дар пойгоҳи додаҳои GenBank мавҷуданд, праймерҳои махсуси намудҳо ва зонд барои коккодҳои C. таҳия карда шуданд. Барои тафтиши вижагии системаи озмоиши офаридашуда, ПКР бо ДНК, ки аз фарҳангҳои холиси 15 намуди мухталифи занбӯруғҳои паразитӣ ва сапротрофӣ, ки бо растаниҳои помидор ва картошка алоқаманданд (Fusarium oxysporum, F. verticillium, Phomopsis phaseoli, Alternaria alternata, Helminthosporium solani, Colletotrichum coccodes) ҷудо карда шуданд. Phellinus ferrugineovelutinus, Stemhylium vesicarium, Helminthosporium solani, Phomopsis phaseoli, Neonectria radicicola, Rhizoctonia solani, Penicillium sp., Cladosporium fulvum, C. cladosporioides). Ҳузури Colletotrichum coccodes DNA дар давраи ҳадди аққали 20-27 муайян карда шуд, дар ҳоле ки намудҳои дигар пас аз 40 давра муайян карда шуданд ё муайян карда нашуданд. Системаи озмоишӣ имкон медиҳад, ки C. дар таркиби омехтаи PCR таҳлилшуда консентратсияи ДНК-ро аз 0.01 нг / мм3 боэътимод муайян кунад. Бо истифода аз системаи санҷишии таҳияшуда, мавҷудияти C. коккодҳо дар барги помидор бо нишонаҳои бемориҳои замбурӯғӣ ва дар бехмеваҳои картошка бидуни аломатҳои берунии беморӣ таҳқиқ карда шуд. Баргҳо бо нишонаҳои сирояти замбӯруғ аз ду соҳаи мухталифи қаламрави Краснодар, бехмева - аз киштзорҳои минтақаҳои Кострома, Москва, Калуга, Нижний Новгород ҷамъоварӣ карда шуданд. Дар қаламрави Краснодар як барги помидор, ки дорои C. coccodes DNA мебошад; мавҷудияти назарраси ДНК-и ин патоген дар 5 намунаи лўндаи дар минтақаҳои Кострома, Москва, Калуга парваришёфта муайян карда шуд.
Муқаддима
Занбурӯғҳои ҷинси Colletotrichum фитопатогенҳои хатарнок мебошанд, ки ба ғалладонагиҳо, сабзавот, гиёҳҳо, растаниҳои бисёрсолаи мевагӣ ва буттамева таъсир мерасонанд. Яке аз намудҳои маъмули ин ҷинс, Colletotrichum coccodes (Wallr).
Хьюз, ангезандаи антракноз ва доғи сиёҳи картошка ва помидор аст ва боиси пайдоиши бемориҳои як қатор дигар растаниҳои оилаи Solanaceae, аз ҷумла. алафҳои бегона (Диллард, 1992). C. коккодҳо ба ҳамаи қисматҳои зеризаминии растанӣ, пояҳо, баргҳо ва меваҳои он таъсир мерасонад (Андривон ва дигарон, 1998; Ҷонсон, 1994). Дар пӯсти луоби картошкаи сироятёфта инкишофи доғҳои хокистарранг бо кунҷҳои номуайян мушоҳида карда мешавад, ки дар онҳо нуқтаҳои сиёҳи спорул ва микросклеротия ба назар намоёнанд. Ҳангоми нигоҳдорӣ, захмҳои дорои мундариҷа метавонанд дар селлюлоза лӯндаҳо пайдо шаванд, яъне. беморӣ ба марҳилаи антракноз ворид мешавад, ки ин хеле кам аст.
Ҳамзамон, аломатҳои антракноз (захми пӯст бо нуқтаҳои хурди сиёҳ) ба меваҳои помидор хосанд. Дар баргҳо нишонаҳои C. коккодҳо ҳамчун доғҳои қаҳваранги сиёҳ ба назар мерасанд, ки одатан бо бофтаҳои зард ҳаммарз мебошанд (Ҷонсон, 1994).
Рушди доғҳои сиёҳ дар бехмева намуди онҳоро вайрон мекунад, ки ин хусусан ҳангоми фурӯхтани картошкаи пӯсти сурхшудаи ба назар намоён ба назар мерасад. Пӯсти пӯст ба бухоршавии барзиёд ва талафоти зиёдшавии захира оварда мерасонад (Hunger, McIntyre, 1979). Зарар ба дигар узвҳои растанӣ боиси талафоти ҳосил мегардад, ки дар заминҳои кушод ва пӯшида қайд карда шудааст (Ҷонсон, 1994; Tsror et al., 1999). Бемориҳое, ки C. коккодҳо ба вуҷуд меоранд, тақрибан дар тамоми минтақаҳои картошкапарварии ҷаҳон, аз ҷумла дар Русия маъмуланд (Leesa, Hilton, 2003; Belov et al, 2018). Назорати ин бемориҳо аз сабаби самаранокии нокифояи фунгицидҳои мавҷуда зидди С коккодҳо ва набудани навъҳои тобовар душвор аст (Хонед, Пинҳон кунед, 1995).
Инокулуми C. коккодҳо метавонад дар лӯнҳои тухмӣ бимонад (Хонед ва Пинҳон кунед, 1988; Ҷонсон ва диг., 1997), тухми помидор (Бен-Даниэл ва дигарон, 2010), муддати дароз дар хок, дар болои партовҳои растанӣ зинда мемонанд (Диллард, 1990 ; Диллард, Кобб, 1993) ва дар мастакҳо (Raid, Pennypacker, 1987). Асарҳои як қатор муаллифон (Хонед, Пинҳон кунед, 1988; Баркдолл, Дэвис, 1992; Ҷонсон ва диг., 1997; Диллард, Кобб, 1993) нишон доданд, ки инкишофи беморӣ дар картошка ва помидор аз бисёр ҷиҳат аз мавҷудияти бемориҳо дар тухмҳо ва хок. Бинобар ин, барои кам кардани талафот аз беморӣ, ташхиси (аз ҷумла миқдорӣ) паҳншавии замбӯруғро дар маводи тухмӣ, дар хок, дар бехмеваҳои тухмии картошка ва тухмии помидор, ки барои нигоҳдорӣ гузошта шудаанд, ташхис кардан лозим аст. Ташхиси морфологӣ дар хок ва маводи растанӣ танҳо бо мавҷудияти микросклеротиа, ки дар дигар намудҳои занбӯруғҳо мавҷуд аст, гузаронида мешавад.
Аломатҳо дар бехмеваҳо ба захми нуқрагин, ки аз замбӯруғи Helminthosporium solani ба вуҷуд омадааст, хеле шабеҳанд. Ҷудокунии коклетҳои Colletotrichum ва Helminthosporium дар фарҳанги холис хеле душвор аст ва аз сабаби суст афзоиш ёфтани муҳити ғизоӣ вақти зиёд мегирад. Барои зуд муайян кардани коккодҳои Colletotrichum, аз усулҳои ташхиси инструменталӣ истифода бурдан лозим аст. Усули аз ҳама мувофиқ реаксияи занҷири полимераза (ПГР) ва тағирёбии он - ПКР дар вақти воқеӣ мебошад. Дар айни замон, системаи озмоишие, ки муҳаққиқони Бритониё таҳия кардаанд (Cullen et al., 2002) барои минтақаи ITS1 рДНА дар Аврупо ва Иёлоти Муттаҳида истифода мешавад. Истифодаи он дар таҳлили изолятҳои Русия натиҷаҳои хуб нишон дод (Белов ва дигарон, 2018). Аммо, C. коккодҳо хеле тағирёбанда мебошанд ва муайян кардани он аз пайдарпаии ягонаи ДНК метавонад ба натиҷаҳои манфии бардурӯғ оварда расонад. Барои ташхиси боэътимод таҳлил барои якчанд пайдарпаии ДНК-ҳои мушаххас зарур аст, ки дар робита бо он мо як системаи аслии озмоиширо таҳия кардем, ки имкон медиҳад, ки коккодҳоро аз рӯи пайдарпаии генҳои глицералдегид-3-фосфати дегидрогеназа муайян кунад.
Мавод ва усул
Барои арзёбӣ кардани самаранокӣ ва мушаххасии системаҳои санҷишии офаридашуда, мо культиваҳои тозаи 15 намуди занбӯруғро, ки муаллифон аз намунаҳои беморонаи барг ва меваи помидор, бехмеваҳои картошка ҷудо кардаанд, истифода кардем (Ҷадвали 1). Барои ҷудоӣ узвҳои растаниҳо бо нишонаҳои сирояти замбӯруғӣ гирифта шуданд, на бештар аз як узв дар як бех.
Як буридаи бехмева бо пӯст, як буридаи меваи помидор ва барги зарардида зери микроскопи дурбин гузошта шуд, ки пас аз он миселия, қаламча ё порчае аз матоъ ба табақаи Петри бо сӯзанҳои тези диссертатсияшуда ба воситаи агар (wort agar) ворид карда шуд. Изолятҳоро дар резиши агар дар найчаҳои озмоишӣ дар 4 ° C нигоҳ медоштанд.
Намунаҳои барги помидор барои таҳлил бо нишонаҳои бемориҳои замбӯруғӣ фавран пас аз ҷамъоварӣ (дар саҳро) дар спирти 70% этил ҷойгир карда шуданд, ки дар он онҳо то ҷудо шудани ДНК нигоҳ дошта шуданд. Лўндаи картошка ба озмоишгоҳ оварда шуда, аз онҳо пӯсти (2 × 1 см) пошида ва дар -20 ° C ях карда шудааст. То он даме ки ДНК ҷудошуда нигоҳ дошта мешавад.
Киштҳои тозаи замбӯруғҳо барои ҷудокунии ДНК дар муҳити нахӯди моеъ парвариш карда шуданд. Мицелияи замбӯруғро аз муҳити моеъ тоза карданд, дар коғази филтр хушк карданд, дар нитроген моеъ ях карданд, гомогенизатсия карданд, дар буфери CTAB инкубатсия карданд, бо хлороформ пок карданд, бо омехтаи изопропанол ва 0.5 М калий ацетат тунук карданд ва ду маротиба бо 2% спирт шуст. Дар натиҷа ДНК дар оби деионизатсия ҳал карда шуда, дар -70 ° С нигоҳ дошта шуд (Кутузова ва дигарон, 20). Консентратсияи ДНК бо истифода аз маҷмӯаи миқдори миқдори HS ДНК барои ДНК-и дуҷониба дар Qubit 2017 (Qiagen, Олмон) чен карда шуд. Намунаҳои спиртшуда ва яхкардашуда дар азоти моеъ тритуратсия карда шуданд, сипас истихроҷи ДНК тавре, ки дар боло тавсиф карда шуд (барои мицелияи фарҳангҳои тозаи замбӯруғӣ) анҷом дода шуд.
Ҷадвали 1. Пайдоиши зотҳои замбӯруғи истифодашуда
Номи занбӯруц | Ниҳол, узв | Ҷои интихоб |
---|---|---|
Colletotrichum коккодҳои 1, C. коккодҳои 2, C. коккодҳои 3, Ilyonectria crassa, Rhizoctonia solani | tuber картошка | Вилояти Кострома, бехмеваҳои картошкаи насли 1-и саҳроӣ, навъи Red Scarlett |
Colletotrichum коксҳои 4 | барге картошка | Ҷумҳур Мари Эл, Йошкар-Ола |
Гелминтоспориуми солани | tuber картошка | Вилояти Магадан, пос. Хайма, бехмеваи картошка |
Cladosporium fulvum | барги помидор | Вилояти Москва, помидори калонмева |
Alternaria tomatophila | меваи помидор | аз ҷониби кормандони лабораторияи микология ва фитопатологияи Институти тадқиқотии умумирусиягии ҳифзи растаниҳо пешниҳод шудааст |
Fusarium verticillium, Phomopsisphaseoli, Alternaria alternata, Phellinus ferrugineovelutinus, Stemphylium vesicarium, Cladosporium cladosporioides, Acrodontium luzulae, Penicillium sp. | меваи помидор | Территорияи Краснодар, ноҳияи Крымский, синфи Крем |
Fusarium oxysporum | решаи гандум | Вилояти Москва |
ПТР дар як щуввазиёдкунии DTprime (DNA-Technology) гузаронида шуд. Барои PCR, праймерҳои аслӣ ва зонд барои минтақаи мушаххаси генҳои глицерин трифосфат дегидрогеназа истифода шуданд: праймерҳои пешрафта Coc70gdf –TCATGATATCATTTCTCTCACGGCA, reverse prim Coc280gdr - TACTTGAGCATGTAGGCCTGGGT1. Праймерҳо минтақаи 213 bp -ро тақвият медиҳанд.
Реакция 50 нг ДНК-и умумиро (ҳангоми таҳлили баргҳо ва бехмеваҳо) ва 10 нгро (ҳангоми таҳлили ДНК-и фарҳангҳои тозаи замбӯруғӣ) гирифт. Омехтаи реаксия (35 мкл) тавассути қабати парафин ба ду қисм ҷудо карда шуд: қабати поёнӣ (20 мкл) 2 мкл буферии реаксияи 10 × (750 mM Tris-HCl, pH 8.8; 200 mM (NH4) 2SO4; 25 mM MgCl2; 0.1% Tween- 20), 0.5 мМ аз ҳар як дезоксинуклеотиди трифосфат, 7 пмоль аз ҳар як праймер ва 4 пмоль аз санҷиши флуоресценти гидролизшаванда; қисми болоии он 1 мкл буферии 10 × PCR ва 1 U полимерази Тақ дошт.
Ҷудокунии омехта бо парафин имкон медиҳад, ки лӯлаҳо муддати дароз дар ҳарорати 5 ° C нигоҳ дошта шаванд ва пас аз 10 дақиқа дар ҳарорати аз 80 ° C гарм кардани онҳо, ПТР оғози гарм таъмин карда шавад. ПТР тибқи барномаи зерин анҷом дода шуд: 94.0 ° C - 90 s (1 давра); 94.0 ° C - 30 с; 64.0 ° C - 15 с (5 давра); 94.0 ° C - 10 с; 64.0 ° C - 15 с (45 давра); 10.0 ° C - нигоҳдорӣ.
Натиҷа ва Гуфтугӯ
Пайдарпаии генҳои глицерин трифосфати дегидрогеназа дар 45 штамми аз баргҳо, пояҳо, бехмеваҳои картошка ва меваҳои помидор ҷудошуда (Кутузова, 2018) дар минтақаҳои гуногуни Русия муайян карда шуданд. Пайдарпаии таҳқиқшудаи ҳамаи зотҳо ба 2 гурӯҳ тақсим карда шуданд, ки аз ду нуклеотид фарқ мекунанд. Пайдарпаии нуклеотидҳои намояндагони ҳарду гурӯҳ таҳти рақамҳои KY496634 ва KY496635 дар GenBank гузошта мешаванд.
Праймерҳои coc70gdf, coc280gdr ва probe cocgdz, ки дар асоси онҳо таҳия шудаанд, бо истифода аз барномаи BLAST тафтиш карда шуданд (www.ncbi.nlm.nih.gov/blast) дар ҳама пайдарпаии генҳои глицерин трифосфати дегидрогеназа аз намудҳои ҷинси Colletotrichum ва дигар организмҳое, ки дар пойгоҳи додаҳои GenBank мавҷуданд.
Ягон минтақаи ДНК-и организмҳои дигар, ки барои праймерҳо ва зонд хеле гомолог мебошанд, ёфт нашуд.
Ҳассосияти системаи санҷишӣ бо истифода аз намунаҳо бо консентратсияҳои гуногуни C. coccodes DNA, ДНК-и барги картошкаи бо антракноз сироятшуда (соли 2017 дар Мари Эл, навъи Red Scarlett ҷамъоварӣ шудааст) ва пӯсти лўндаи аз доғи сиёҳ гирифторшуда (дар вилояти Кострома ҷамъоварӣ карда шуда, навъи Red Scarlett, Ҷадвали 2). Барои тасдиқи мавҷудияти ДНК дар бехмева ва баргҳои картошка, зотҳои C. коккодҳоро аз онҳо ба фарҳангҳои холис ҷудо карданд.
Натиҷаҳои таҳлили ҳассосияти системаи санҷишӣ нишон медиҳанд, ки он метавонад барои бомуваффақият ташхис кардани мавҷудияти C. coccodes DNA дар намуна истифода шавад, вақте ки миқдори умумии он дар омехтаи ПТР зиёда аз 0.05 нг бошад. Ин барои ошкорсозӣ басанда аст, зеро як склеротиа ба ҳисоби миёна 0.131 нг ва дар як спора тақрибан 0.04 нг ДНК мавҷуд аст (Каллен ва дигарон, 2002). Системаи озмоишии аз ҷониби гурӯҳи бритониёӣ таҳияшуда (Cullen et al., 2002) ҳассосияти ба ин монандро нишон дод (давраи ҳадди аксар дар ДНК-и 34 нг ва 0.05 дар 37 нг).
Таҳлили намунаҳои табиии дорои коккодҳои С дар ҳама ҳолатҳо имкон дод, ки ҳузури он дар намуна боэътимод ошкор карда шавад (Ҷадвали 2). Усули пешниҳодшуда барои ҷудокунии ДНК инчунин ҳангоми таҳлили намунаҳои растаниҳои табиӣ татбиқ карда мешуд.
Ҷадвали 2. Муайян кардани ҳассосияти системаи санҷишии пешниҳодшуда барои муайян кардани коккодҳои Colletotrichum барои PCR дар вақти воқеӣ
Намунаи | Миқдори ДНК дар намуна *, нг | Давраи остона | C. муайянкунии коккодҳо |
---|---|---|---|
Коккодҳои Mycelium Colletotrichum | 50 | 21.3 | + |
5 | 25.7 | + | |
0.5 | 29,7 | + | |
0.05 | 33.5 | + | |
0.005 | 40 | - | |
0.0005 | 42.8 | - | |
0.00005 | - | ||
Пӯсти бехмева 1 | 50 | 32 | + |
Пӯсти бехмева 2 | 50 | 30 | + |
Пӯсти бехмева 3 | 50 | 31.5 | + |
Барги картошка | 50 | 29.5 | + |
Шарҳ. * Дар омехтаи маҳсулоти ПТР.
Хусусияти системаи санҷишӣ дар намунаҳои ДНК, ки аз 15 намуди занбӯруғҳо гирифта шудаанд, санҷида шуд. Ҳама зотҳои замбӯруғро муаллифон аз меваҳои зарардида ва солим ва баргҳои помидор, картошка ҷудо кардаанд; як решаро аз решаи гандум ҷудо карданд (Ҷадвали 1). Дар байни онҳое, ки аз сатҳи мева ҷудо карда шудаанд, намудҳое ҳастанд, ки барои помидор патогенӣ нестанд (масалан, Phellinus ferrugineovelutinus).
Таҳқиқотҳо нишон доданд, ки C. coccodes DNA дар давраи ҳадди аққали 20-27 муайян карда шудааст, дар ҳоле ки дигар намудҳои занбӯруғӣ муайян карда нашудаанд ва ё пас аз давраи 40 сигнал додаанд, ки онро ба таъсири ғайримуқаррарӣ мансуб кардан мумкин аст (Ҷадвали 3).
Ҷадвали 3. Санҷиши системаи озмоишӣ барои намудҳои гуногуни занбурӯғҳо
Номи занбӯруц | Давраи остона |
Коккодҳои Colletotrichum 1 | 20.9 |
C. коккодҳо 2 | 22.6 |
C. коккодҳо 3 | 23 |
C. коккодҳо 4 | 22 |
Fusarium oxysporum | > 40 |
F. verticalillium | > 40 |
Rhizoctonia solani | > 40 |
Фазополи Phomopsis | > 40 |
Alternaria alternata | > 40 |
A. tomatophila | > 40 |
Гелминтоспориуми солани | > 40 |
Phellinus ferrugineovelutinus | > 40 |
Весикариуми стемфилӣ | > 40 |
Ilonectria crassa | > 40 |
Cladosporium cladosporioides | > 40 |
C. fulvum | > 40 |
Акродонтий лузулаҳо | > 40 |
Пенсилиллӣ SP. | > 40 |
Шарҳ. * Миқдори ДНК дар ҳамаи намунаҳо 10 нг буд.
Системаи санҷишии таҳияшуда барои муайян кардани C. коккодҳо дар намунаҳои барги помидор бо нишонаҳои патогенҳои некротрофӣ ва бехмеваи тухмии картошка бидуни нишонаҳои намоён истифода шудааст. Барои омӯзиш мо лўндаи тухмии навъҳои гуногунро гирифтем, ки дар минтақаҳои Кострома, Москва, Калуга, Нижний Новгород мерӯянд. Мавҷудияти C. coccodes DNA дар намунаҳо боэътимод дониста шуд, ки дар таҳлили онҳо давраи ҳадди ақалл аз 35 зиёд набуд. Ин арзиши остона дар асоси муайянкунии боэътимоди 0.05 нг C. coccodes DNA (давраи остона 33.5, ҷадвали 2) ва далели он дар давраҳои ҳадди аксар аз 40 ташхис карда шуд, ки ДНК-и номуайяни баъзе намудҳои занбӯруғӣ. Бо ин равиш, ҳузури назарраси C. coccodes DNA дар 5 намунаи лўндаи дар минтақаҳои Кострома, Москва, Калуга ва дар як барги помидор аз ноҳияи Еиски вилояти Краснодар парваришёфта муайян карда шуд (Ҷадвалҳои 4, 5).
Ҷадвали 4. Муайян кардани коккодҳои Colletotrichum дар бехмеваҳои картошка *
Рақами намуна | Навъи картошка | Ҷои калоншаванда | C. муайянкунии коккодҳо | Давраи остона |
---|---|---|---|---|
1 | Шарҳи сурх | Вилояти Кострома | + | 35 |
2 | + | 35 | ||
3 | - | 38 | ||
4 | Санте | Вилояти Москва | + | 34 |
5 | - | |||
6 | - | 41 | ||
7 | - | 41.8 | ||
8 | + | 30 | ||
9 | Жуковский барвақт | Вилояти Москва | - | 40.5 |
10 | - | 40.6 | ||
11 | - | |||
12 | Молли | Вилояти Калуга | + | 34.3 |
13 | - | 38.4 | ||
14 | Фантазия | Вилояти Калуга | - | |
15 | Гала | Вилояти Нижний Новгород | - | |
16 | - |
Шарҳ. * Миқдори ДНК дар ҳамаи намунаҳо 50 нг буд.
Ҷадвали 5. Муайян кардани коккодҳои Colletotrichum дар барги помидор *
Рақами намуна | Ҷои калоншаванда | C. муайянкунии коккодҳо | Давраи остона |
---|---|---|---|
1 | Территорияи Краснодар, ноҳияи Крим | - | |
2 | - | ||
3 | - | ||
4 | - | 45 | |
5 | - | ||
6 | - | ||
7 | - | ||
8 | - | ||
9 | Территорияи Краснодар, ноҳияи Еиск | - | 39.2 |
10 | - | 40.8 | |
11 | - | ||
12 | - | 41.6 | |
13 | - | 40 | |
14 | - | 41 | |
15 | - | 41.9 | |
16 | - | ||
17 | - | ||
18 | - | 40.3 | |
19 | - | ||
20 | - | ||
21 | + | 34.5 | |
22 | - | ||
23 | - |
* Миқдори ДНК дар ҳамаи намунаҳо 50 нг буд.
Системаи озмоишие, ки мо сохтаем, аз ҷиҳати ҳассосият ва вижагӣ аз системаи таҳиякардаи бритониёӣ (Cullen et al., 2002) кам нест ва барои таҳлили намунаҳои растанӣ мувофиқ аст. Татбиқи он барои таҳлили лӯндаи тухмӣ имкон дод, ки C. дар кокулҳо ДНК-ро бе аломатҳои берунии зарар муайян карда, сирояти баргҳо бомуваффақият таҳлил карда шавад.
То имрӯз дар Русия ягон таҳлили бехмеваҳои картошка барои ҳамла кардани C. коккодҳо гузаронида нашудааст. Тадқиқоти аввалини мо нишон дод, ки аз 16 бехмеваи тухмии озмудашуда, ки дар минтақаҳои гуногуни Федератсияи Россия мерӯянд, 5-тоаш коккодҳои C. дорад. Ин нишон медиҳад, ки нуқтаи сиёҳи лӯндаи картошка дар Русия як бемории маъмулии картошка аст ва нақши он дар коҳиш додани ҳаҷм ва сифати зироати картошка нодида гирифта шудааст.
Таҳлили барги помидор ҳузури назарраси C. coccodes DNA дар як барг аз ноҳияи Еиски қаламрави Краснодарро нишон дод. Қаблан, ҳангоми азназаргузаронии майдонҳои помидор дар ҷануби Русия бо истифода аз системаи тестии Бритониё (Cullen et al., 2002), баргҳои дорои C. coccodes ва дар баъзе майдонҳо ҳиссаи зиёди баргҳои бо coccodes сироятёфта ёфт шуданд (Белов ва дигарон, 2018). Дар қаламравҳои Краснодар ва Приморский, вилояти Маскав мо меваҳои помидорро пайдо кардем, ки мо тавонистем аз онҳо фарҳанги тозаи C. коккодҳоро ҷудо кунем. Эҳтимол дорад, ки C. коккодҳо дар помидор дар Русия нисбат ба оне, ки ҳоло боварӣ доранд, хеле зиёдтар паҳн шудааст ва зарари он низ нодида гирифта шудааст.
Ҳамин тариқ, то имрӯз дар бораи паҳн шудани гиёҳҳои коккодии картошка ва помидор маълумоти кофӣ ҷамъ шудааст.
Барои беҳтар фаҳмидани нақши ин занбӯруғ дар рушди бемориҳои картошка ва помидор, назорати васеъ ба паҳншавии он дар Русия, омӯзиши нақши сирояти хок ва тухмӣ ва нақши доғи сиёҳ дар талафот ҳангоми нигоҳдорӣ зарур аст. Истифодаи ташхиси ПГР метавонад ин корро ба таври назаррас сабук кунад ва истифодаи ҳамзамони ҳарду системаи санҷишӣ дақиқии таҳлилро ба таври назаррас афзоиш медиҳад.
Ин кор бо гранти Бунёди Илми Русия таҳти рақами 18-76-00009 дастгирӣ карда шуд.
Мақола дар маҷаллаи Mycology and Phytopathology (ҷилди 54, No1, 2020) нашр шудааст.